當前,新型冠狀 病毒防控形式仍然十分嚴峻,作為核酸檢測的第 一步,樣本采集與保存的重要性毋庸置疑,此前市場(chǎng)上的病毒保存液幾乎都是直接保存活病毒,導致采樣、運輸和檢測中的醫護人員均面臨較高的感染風(fēng)險,針對這種情況,抗疫一線(xiàn)非常需要能直接滅活病毒的樣本保存液,這樣可以大大提高樣本采集、運輸過(guò)程中的安全性。
但應該注意的是:在滅活病毒的同時(shí),保存液還應考慮能否穩定保存病毒核酸的完整性,避免樣本中的核酸在檢測前降解,造成核酸檢測“假陰性”。
本文對比了市面上含胍鹽成分的病毒保存液與我公司研制的病毒保存液,他們的保存效果究竟如何呢?
下面,我們用數據說(shuō)話(huà):
分別用含胍鹽成分的保存液1、2,和不含胍鹽成分的我們公司的保存液,在37℃條件下保存RNA病毒。
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結果發(fā)現,保存1-7天后,用我們公司保存液保存的病毒核酸,Ct值未見(jiàn)明顯變化,說(shuō)明病毒核酸穩定存在,未降解,而其他兩種胍鹽成分保存液保存的病毒核酸Ct值則隨著(zhù)天數的增加而有明顯增加,保存效果明顯弱于我們的保存液。從病毒RNA的保存效率上看,同樣都是37℃的條件,保存1-7天后,使用我公司的保存液,病毒核酸保存效率基本恒定在100 %,而胍鹽成分保存液隨著(zhù)天數的增加,病毒核酸的保存效率逐漸降低,到第7天的時(shí)候,已經(jīng)低于20%。
從病毒核酸的降解率來(lái)看,同樣都是37℃的條件,保存1-7天后,使用我們的保存液,病毒核酸幾乎沒(méi)有降解,而使用胍鹽成分保存液,隨著(zhù)天數的增加,病毒核酸的降解率大幅增加,到第7天的時(shí)候,胍鹽成分保存液保存的病毒核酸幾乎完全降解。
由此看出,主要成分是胍鹽的保存液,保存效果并不理想。原來(lái),胍鹽(異硫氰酸胍或鹽酸胍等)作為一種經(jīng)典的蛋白變性劑,常用于核酸提取中的細胞裂解,也可以達到滅活病毒的效果,但實(shí)驗結果發(fā)現,胍鹽成分幾乎不具備在常溫條件下保存病毒核酸的能力,比較容易造成樣本降解,導致“假陰性”,因此不太適合用于新冠病毒樣本的保存,所以建議您選擇非胍鹽成分的病毒保存液。
我公司委托高校專(zhuān)家研制的病毒樣本保存液,含有特殊的蛋白變性劑和核酸穩定劑:蛋白變性劑可以迅速破壞病毒外殼蛋白質(zhì)的二級結構,將病毒滅活,核酸穩定劑可以常溫穩定保存病毒核酸不降解。在病毒核酸的保存效果上明顯優(yōu)于含胍鹽成分的常規裂解液,可以在37℃條件下穩定保存7天,非常利于當前新冠病毒核酸檢測的樣本保存
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